有料回顧 | 穩定、經濟的灌流培養工藝控制策略

By 賽多利斯生物工藝

賽多君@你

這一期非同反響的直播回顧

我們已經準備好了！

主講嘉賓

夏忠武

賽多利斯上游產品應用專家

主要內容

■ 目前常見增強培養工藝及其特點介紹

■ 灌流工藝控制主要考量點分析

■ 前沿穩健，經濟的灌流培養工藝控制策略

Q1

請問有什么方案可緩解ATF柱體的堵塞情況？

答：對于緩解ATF柱堵塞，可嘗試以下方法：

1.維持較高細胞活力。

2. 通過bleed控制細胞密度在合適水平。

3. 通過濃縮補料的方式降低換液速率。

Q2

灌流培養工藝蛋白質量與搖瓶工藝蛋白質量不一致如唾液酸等，從哪些方面入手解決呢？

答：搖瓶培養因pH等參數均與反應器有較大區別，導致搖瓶中目標產物質量與反應器上有一定差別。傳統方法一般在搖瓶階段主要關注點在目標產物產量，在反應器中做工藝優化時通過相關工藝手段調控產物質量。也可以采用Ambr15等高通量反應器代替搖瓶，因pH等參數均可控，可獲得與反應器相當質量的目標產物。

Q3

灌流培養如何控制一定的細胞密度？

答：傳統方案可定期取樣離線測培養體系中細胞密度，根據離線測得的值計算需要抽出細胞的量及需要補充培養基的量。但該方法受限于取樣頻率，可能會給培養體系帶來較大波動。

較為前沿的方法是整合在線活細胞監測探頭，該探頭與細胞bleed泵及補料泵做反饋控制來調節細胞密度。該方法控制比較穩定。

Q4

消泡劑大概應該控制在多少，不會對下游影響，加了消泡劑D0會下降比較厲害，這是為什么？

答：在培養過程中，消泡劑盡量少加，一般控制在100PPM以內。具體加多少會對下游產生明顯影響因培養基等不同也存在差異。

在培養過程中，泡沫的存在，能延長氣體與液體接觸時間，同時能增大氣體與液體接觸面積，從而對DO的維持有促進作用。消泡劑的加入會消除這些促進作用，故而加消泡劑后會看到DO有一個明顯下降。

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